Gen Agar LE Agarose 1200电泳琼脂糖
产品说明
琼脂糖( Agarose )电泳是检定、分离 DNA 片段的重要手段,进行琼脂糖凝胶电泳时,琼脂糖的纯度会直接影响 DNA 的分辨能力及电泳结果的清晰度。如琼脂糖中混有其它糖、盐及蛋白质,会影响 DNA 在胶中的迁移速度及回收后的 DNA 片段进行酶促反应时的反应性能。因此,使用高质量的琼脂糖对实验的成功非常重要。
LE-Agarose1200 为高纯度的琼脂糖制品,适合于制作 0.5% ~ 2% 的琼脂糖凝胶。制品中筛除了 DNA 电泳抑制物及核酸酶等。用 EtBr 染色时背景低,电泳分离性能强,条带清晰,适合于各种 DNA 片段的电泳。使用本制品进行电泳后的 DNA 片段可进行回收,是一种经济又理想的常规 DNA 电泳用琼脂糖。
分析明细表
凝胶温度: 33 ± 1.5 ℃
电渗度( -Mr ): 0.1 ~ 0.15
1.0% 浓度凝胶强度 ≥ 1200g /cm 2
硫化物:0.15 ~ 0.2%
制胶浓度
琼脂糖凝胶浓度与线形 DNA 的最佳分辨范围
琼脂糖浓度 最佳线形 DNA 分辨范围( bp )
0.8% 800 ~ 12 , 000
1.0% 400 ~ 8 , 000
1.5% 200 ~ 4 , 000
2.0% 100 ~ 3 , 000
凝胶制备方法
甲法:
⑴配制适量的电泳及制胶用的缓冲液(通常是 0.5x TBE 或 1xTEA )
⑵根据制胶量及凝胶浓度,在加有一定量的电泳缓冲液的三角锥瓶中,加入准确称量的 琼脂糖粉(总液体量不宜超过锥 瓶的 20% 容量)。
注意:用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须统一。
⑶在锥瓶的瓶口上盖上保鲜膜,并在膜上扎些小孔,然后在微波炉中加热时,当溶液沸腾时,请带上防热手套,取出锥瓶,小心播动锥瓶,使 琼脂糖充分均匀溶解。此操作重复数次,直至琼脂糖完全溶解。必须注意,在微波炉中加热时间不宜过长,每次当溶液起泡沸腾时停止加热,否则会引起溶液过热暴沸,造成琼脂糖浓度不准,也会损坏微波炉。溶解琼脂糖时,必须保证琼脂糖充分完全溶解,否则,会造成电泳图模糊不清。
⑷使溶液冷却至 60 ℃ 左右,如需要可在溴化乙锭溶液(终浓度 0.5ug/ml )并充分混匀。
注意:溴化乙锭是一种致癌物质,使用含有溴化乙锭溶液是,请戴用手套。
⑸将 琼脂糖溶液倒入制胶模中,然后在适当位置处插上梳子。凝胶厚度一般在 3 ~ 5mm 之间。
⑹在室温下使胶脂凝固 (大约 30 分钟~ 1 小时),然后放置于电泳槽中进行电泳。
注意:凝胶不立即使用时,请用保鲜膜将凝胶包好后在 4 ℃ 下可保存 2 ~ 5 天。
乙法:
①请将 琼脂糖及 TBE 、 TEA 等 Buffer 液放入至少需要量之琼脂糖液 4 ~ 5 倍大容量之烧瓶或烧杯。
②用微波炉以低热点( Low power )每 100cc 加热 3 ~ 5 分,使其沸腾(但多量时增加时间)然后取出。
③补充蒸发减少之液量,温和搅拌内溶液,若有未溶解者,使其平均后,再以②阶段之方式加热,需要时可使用比较高一点之 Low-Mild 热力,煮沸 1 ~ 2 分钟至完全溶解之。
注意:请设于低热点加热,以免溢出器外受损。
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